Hầu hết, các loại que thử đều dùng để phát hiện ra một chất, đó chính là hormone hCG. Loại hormone này được sản xuất trong giai đoạn đầu tiên của thai kỳ. Khi hormone này xuất hiện, nó sẽ thông báo cho cơ thể không làm bong tróc lớp lót bên trong tử cung vào tháng đó. HCG cũng hỗ trợ quá trình hình thành nhau thai. Que thử thai sẽ thông báo cho bạn biết bạn có mang thai hay không, thông qua việc phát hiện nồng độ hCG trong nước tiểu.
Trên thân của que thử có chứa một sợi mỏng, loại sợi này được bao phủ bởi một số kháng thể nhất định có phản ứng với hormone hCG. Sau khi thử với nước tiểu, nếu xuất hiện 2 vạch màu đỏ trên que thử thì chứng tỏ bạn đã mang thai. Ngược lại, nếu trên que thử xuất hiện 1 vạch, điều này báo hiệu bạn không có thai.
Tuy nhiên, trong quá trình sử dụng que thử thai vẫn có thể xảy ra những tình huống khác. Ví dụ, bạn đã có thai nhưng nồng độ hormone trong nước tiểu còn thấp, dẫn đến việc chưa đủ để que thử nhận biết. Trường hợp khác có thể bạn đã mua lầm que thử kém chất lượng hoặc chưa thực hiện đúng các bước hướng dẫn sử dụng dẫn đến que thử cho kết quả sai.